PENYIAPAN PREPARAT MIKROORGANISME HIDUP

PENYIAPAN PREPARAT MIKROORGANISME HIDUP

UNTUK PENGAMATAN MIKROSKOPIS

Tujuan  : mengamati pergerakan mikroba dengan menggunakan preparat

 basah (wet preparation) dan preparat tetes gantung

Prinsip  : Bakteri akan bergerak karena disebabkan oleh adanya flagel dan kinetas air

Dasar Teori

Didunia ini banyak sekali mikroorganisme yang tidak memilkiki zat warna,sehingga apabila dilihat mikroba ini terlihat transparan sehingga perlu dilakukan penegcatan atau fiksasi.akan tetapi jika kita ingin memeriksa mikroba yang masih hidup dapat digunakan  teknik pembuatan preparat. “dua macam preparat yaitu preparat basah  dan preeparat kering.preparat basah dibagi menjadi wet preparation dan preparat tetes gantung”(maulina dan agus.2012.7)

Pada pemeriksaan mikroorganisme dengan preparat tetes gantung didapat sejumlah mikroorganisme yaitu  .dalam pembuatan preparat dengan teknik gantung kita harus tahu bagaimana cara pembuatanya. awalnya setetes cairan yang mengandung mikroba (air jerami) ditempatkan ditengah – tengah sebuah kaca penutup.kemudian bagian – bagian ditepi kaca penutup ini di olesi vaselin.kaca objek khusus yang tengahnya cekung dirapatkan pada kaca penutup yang berfaselin,kemudian segera dibalikkan.vaselin yang telah dioloskan pada tepi atau pinggir kaca penutup akan menyegel atau merapatkan kaca objek dan kaca penutup.

Alasan untuk membuat preparat tetes gantung ini adalah untuk mengamati motilitas suatu mikroorganisme. “motalitas adalah kemampuan dari suatu makhluk hidup untuk bergerak dengan kekuatan sendiri”. (jeneng taringan,1989.51). Karna gerakan mikroorganisme dapat bergerak bebas dalam preparat gantung maka motilitas dapat diamati. “gerak motilitas berbeda dari gerak brown,suatu motalitas makhluk hidup selalu menuruti arah tertentu”.

Alat dan bahan

A.      Alat :                                                                 

-          Mikroskpo                  

-          Deck glas

-          Kaca benda cukung

-          Kaca penutup

-          Pipet tetes

-          Vaselin

-          Jarum ose

-          Alkohol

B.      bahan

Biakan mikroba dalam air rendaman jerami

Cara kerja

1.      Wet preparation

a)         Meletakan setets air rendaman jerami yang pipet ditengah – tengah kaca benda

b)         Mengusap sedikit vaselin pada seluruh tepi  kaca penutup.

c)          Meletakan dengan hati hati kaca penutup tsb pada tetesan air dan tekan perlahan – lahan

d)         Mengamati dengan mikroskop mulai perbesaran lemah sampai perbesaran kuat,

2.      Preparat tetes gantung

a)         Mengusap sedikit vaselin pada seluruh tepi kaca penutup

b)         Melatakan setetes air rendaman jerami dengan pipet ditengah – tengah kaca penutup tsb

c)          Memegang kaca benda cekung dengan bagian cekunganya menghadap ke bawah.

d)         Mendekatkan kaca benda perlahan lahan pda kaca penutup

e)         Tekan perlahan – lahan sehingga vaselin menyebar dan memebentuk segel

f)          Membalikan dengan cepat kaca tersebut

g)         Mengamati dengan mikroskop mulai dari perbesaran lemah sampai kuat

3.       Tetesan tegak

1)      Disiapkan objek glass/ slide yang bersih dan bebas lemak

2)      Diberi 1 tetes NaCl steril ditengah-tengah object glass

3)      Disterilkan ose dengan memijarkan menggunakan lampu spritus, ditunggu sampai kira-kira dingin.

4)      Diambil sampel/ kultur bakteri dengan ose yang sudah dingin, 1 ose penuh (diameter 3 mm). Mengambil bakteri harus membelakangi lampu bunsen.

5)      Diletakkan ditengah-tengah objek glass tersebut .

6)      Dihomogenkan bersama dengan NaCl steril menggunakan ose

7)      Disterilkan lagi jarum ose, kemudian ditaruh ditempatnya.

8)      Dilihat sediaan dengan mikroskop menggunakan perbesaran 10 x (lensa okuler) dan 40 x (lensa objektif).

9)      Dimasukkan sediaan  kedalam cairan desinfektan jika telah selesai dilihat.